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关于小苍兰的组培技术与研究
发布时间:2020-05-08

                                                                                        小苍兰(Freesia refracta

(一)国内外研究概况

小苍兰又名香雪兰,属鸢尾科,香雪兰属植物。多年生草本,地下具圆形或圆锥形鳞茎,叶f生,为条形;总状花序,小花单朵立于弯成水平状的花茎上;花为漏斗形,有细长花筒,花有红色、桃红色、绿色、黄色、白色和紫色等,香气浓郁。小苍兰切花以其色、香、姿俱佳,深受人们的喜爱,是当今世界上十大名贵切花之一。

小苍兰一般进行播种或分球繁殖。关于组织培养方面的研究,国内外已有不少成功的报道。小苍兰的组织培养可采用球茎、茎尖、茎干、叶片、花茎、花芽或花药等部位作为外植体,经愈伤组织――不定芽途径或侧芽增生途径进行大量增殖。

(二)有效的培养方法

1、培养基配方

诱导培养基  MS+BA 3mg/L+NAA 0.2mg/L

增殖培养基  MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.01mg/L

生p培养基  MS(或1/2MS+NAA 0.01mg/L

2、培养程序

1)取材  小苍兰在规模化的组培快繁生产中,以茎尖作为外植体效果较好,组培苗发生变异的几率较低。应选择健壮和将萌芽的球茎进行接种。

2)灭菌  将种球剥去外皮,经洗衣粉常规清洗后,用75%的酒精消毒5min,再用0.1%升汞溶液浸泡10min,然后在1%次氯酸钠溶液中浸泡10min,无菌水洗2次,切取内部0.5~0.8cm大小的茎尖,接入芽n导培养基。

3)生长及分化  外植体材料在诱导培养基上经过30d的培养后,每块茎尖均萌发出不定芽,将不定芽分切,转移到增殖培养基上继代,15d后不定芽发育成苗并有一定数量的增殖。

4)生根培养  将长至2~3cm的小苗切下,转接到生根培养基上,经过10d左右的培养,便可形成带根系的再生植株,即可出瓶移栽。

(三)质量标准及调控技术

在诱导培养基上,有时不定芽基部会产生愈伤组织,并分化出苗。由于小苍兰是杂合体植物,愈伤组织增殖的途径不利于其观赏性状的稳定,在继代培养时,最好不采用以愈伤组织增殖的材料。

正常情况下,小苍兰用球茎繁殖,当球茎达到一定体积后,才能形成正常开花的植株。在离体培养条件下,直接诱导出小球茎,无疑比直接得到完整植株更为优越。一方面,小球茎容易保存和繁殖,另一方面小球茎比完整植株提前达到开花阶段。据报道,在小苍兰生根培养阶段,低温条件可显著地促进小苍兰组培苗的瓶内结球。将小苍兰的无根苗移至MS+IBA 0.5mg/L+嘈蕴0.5%的培养基上,于13℃下培养1个月后,其结球率为83.3%,平均每株苗结球1.8个。另外采用7000lx的强光培养,小苍兰组培苗也可直接形成球茎。

(四)出瓶苗的过渡管理

将出瓶后的组培苗用水洗去基部的培养基,移栽至经过灭菌处理的由腐殖土、珍珠岩按体积以1:5的比例配成的混合基质中。移栽前期,将空气湿度保持在80%~90%间,遮光率为50%,环境温度保持在12~18℃之间。经1~2个月的精细管理,即可定植于富含腐殖质的砂质壤土中。小苍兰喜微潮偏干的土壤环境。在定植时不必施用基肥,随着小苗对外界环境的适应,每隔1~2周追施一次稀薄的液体肥料。小苍兰虽喜阳光充沛的环境,但组培苗定植后不可接受过强的日光照射,应先遮荫,再逐渐增加光照。小苍兰喜凉爽,忌高温,需将环境温度保持在14~24℃之间。

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