1、培养基制备室用75%酒精喷雾降尘，紫外灯照射20分钟。
2、琼脂溶解后，加入各种元素（大量元素、微量元素、有机物和铁盐）和激素，加热到沸腾后停止加热，定容。
3、加入1菌剂，调PH，分装到培养瓶，封口时间不超20min。（建议及时封口保证成功率）
4、若用培养瓶作为培养容器，为了降低污染，可以高压灭菌，灭菌方法同传统方式，只是灭菌时间由原来的15min~20min，降到10min，也可以只对培养瓶进行灭菌使用，装入培养基后就不许再灭菌。若用一次性塑料杯，PE保鲜膜封口可以不经过高压灭菌。
5、接种室用75%酒精喷雾降尘，紫外灯照射30分钟，用75%酒精将接种台面和手擦拭，打开瓶盖，用已灭菌的接种工具，把外植体接种到培养基上，然后封口。
6、培养室要保持干净，可以经常用洁尔灭处理。生根阶段，可以在温室内培樱如果温室条件好，培养条件控制设施齐全，整个过程都可以在温室内进行培养。
